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运用高保真酶扩增人线粒体全长DNA

发布日期:2020年03月10日浏览量:

[数据提供:复旦大学附属眼耳鼻喉科医院,纪老师,主攻与听觉医学相关的各种疾病,包括遗传性耳聋相关基因检测及检测结果分析]

目的:

从病人血液样本中提取线粒体DNA,并扩增线粒体全长,以鉴定病人的线粒体DNA是否有大片段缺失。

案例材料:

五份血液样本DNA (15ng/μL左右)

2×G5 High-Fidelity PCR Mix(NovaBio # G301

引物:

Forward primer:  CCGCACAAGAGTGCTACTCTCCTC(Tm:64.5℃/Primer5计算,正常产物长度:16569bp)

Reverse primer:  GATATTGATTTCACGGAGGATGGTG(Tm:63.8℃/Primer5计算)

体系:

1.png

PCR程序:

1.png

结果:

1.png

M:  DNA marker 15kb: 500bp,1000bp,1500bp,3000bp,5000bp,7500bp,10000bp,15000bp

1: J302样本

2. J303样本

3. J304 样本

4. J304样本

5. 对照基因组DNA

附录:

扩增片段:

1.png

 下载附件:

客户案例二G301.pdf