您好,欢迎来到新贝生物(Novabio)!
联系电话:195 1212 5884 产品订购:sales@xinbeibio.com
当前位置:首页 > 产品中心 > DNA克隆 > T4 DNA 连接酶 > 浏览产品

产品中心

PRODUCTS

联系人:江经理

电话:195 1212 5884  

Q Q:129 4122 659

邮箱:sales@xinbeibio.com

  • Fast T4 DNA Ligase
  • Fast T4 DNA Ligase

Fast T4 DNA Ligase

货号:B102
产品详情
货号
规格
价格
保存条件
B102-01
100,000 U(100次反应)
RMB 2000 1199
-20℃

产品介绍

    本品中的Fast T4 DNA Ligase能催化dsDNA或者RNA的5'- 磷酸末端和3'-羟基形成磷酸二酯键,该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接,修复双链DNA,RNA,DNA/RNA 杂交链中的单链切口。本品中Fast T4 DNA Ligase和2 × Fast Reaction Buffer 经过了精心优化,能实现室温下5分钟快速连接反应。

产品组成

image.png

产品使用

    A.粘性末端连接/平末端连接

    2×Fast Reaction Buffer请混匀放置冰上备用,按照以下顺序加样,并使用移液器轻柔混匀:

image.png

    ※  线性化载体pmol = [( X ng ÷ 长度 ) × 1.5] 。

      例如 100ng 的5000 bp载体pmol = [(100 ng ÷ 5000 bp)× 1.5 ]= 0.03 pmol。

    § 插入片段ng = [(插入片段长度 ÷ 载体长度)× 载体的ng  ×  摩尔倍数1-5]。

      例如800 bp片段插入5000 bp载体,线性化载体量为100 ng,插入片段ng = [(800 bp ÷ 5000 bp) × 100 ng  ×   5倍] = 80 ng。

    B.连接反应条件

    室温(25℃) 孵育5分钟,反应后-20℃存储或者放置冰上用于转化。

    C.连接产物转化

    (使用化学感受态可参照以下步骤,或以使用的感受态说明书为准)

    C.1   在冰上解冻克隆感受态细胞,取10 μl连接产物加入到100 μl感受态细胞中,轻弹管壁混匀,冰上静置30 min(连接产物不要超过感受态体积的1/10)。

    C.2   42℃水浴热激45秒,立即冰上冷却2-3分钟。加900 μl SOC或LB培养基(不添加抗生素),37℃摇菌1小时(转速200 - 250 rpm)。

    C.3   将相应抗性的LB平板固体培养基在37℃培养箱中预热。5,000 rpm离心5 min,弃掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。

    C.4   37℃培养箱中倒置培养12-16 h。

 注:本品仅供科研使用,不能用于人和动物医疗诊断。


Fast T4 DNA Ligase产品说明(B102).pdf


联系人:江经理

电话:195 1212 5884  

Q Q:129 4122 659

邮箱:sales@xinbeibio.com

上一篇:没有了
下一篇:没有了