您好,欢迎来到新贝生物(Novabio)!
联系电话:195 1212 5884 产品订购:sales@xinbeibio.com
搜索
当前位置:首页 > 产品中心 > DNA克隆 > Topo克隆 > 浏览产品

产品中心

PRODUCTS

联系人:江经理

电话:195 1212 5884  

Q Q:129 4122 659

邮箱:sales@xinbeibio.com



  • Topo Cloning Mix
  • Topo Cloning Mix

Topo Cloning Mix # B103

货号:B103
产品详情
货号
规格
价格
保存条件
B103-01
20 rxns
RMB 800 700
-20℃

产品介绍

    本品含有Topoisomerase、含有自杀基因ccdB的载体,配合优化Buffer,能实现室温5 min完成高效连接。含有的自杀基因,当片段与载体连接会破坏ccdB的表达使得细胞能正常生长,反之则不能生长,实现零背景。添加的平端化酶,使得本品可以兼容TA克隆和平末端克隆。

图片.png

产品组成

image.png

*含Topoisomerase和Topo载体(Kana、Amp双抗性,ccdB自杀基因)

产品特点

    易·组分预混

    快·5分钟完成连接

    广·平端克隆,TA克隆均可兼容

产品使用

    A.获得目的片段

    引物5’端不含有磷酸基团;

    使用Taq酶或者高保真酶扩增均可;

    割胶回收最佳。

    B.连接体系

    5 × Topo Cloning Mix冰上解冻后混匀备用,在冰上依次加入以下组分:

图片.png

※ 纯化回收产物最适使用量= [0.05 ×  长度] ng

移液器轻柔混匀,室温(25℃ - 37 ℃)反应5 min,之后放置冰上备用。

    C.连接产物转化

    (使用化学感受态可参照以下步骤,或以使用的感受态说明书为准)

    C.1   在冰上解冻克隆感受态细胞,取10 μl重组产物加入到100 μl感受态细胞中,轻弹管壁混匀,冰上静置30 min。

    C.2   42℃水浴热激45秒,立即冰上冷却2-3分钟。加900 μl SOC或LB培养基(不添加抗生素),37℃摇菌1小时(转速200 - 250 rpm)。

    C.3   将相应抗性的LB平板固体培养基在37℃培养箱中预热。5,000 rpm离心5 min,弃掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无       

     菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。

    C.4   37℃培养箱中倒置培养12-16 h。

    D.连接产物转化

    PCR鉴定/酶切鉴定/测序

    E.附载体信息

图片.png

 注:本品仅供科研使用,不能用于人和动物医疗诊断。


产品说明书:

Topo Cloning Mix产品说明(B103).pdf


联系人:江经理

电话:195 1212 5884  

Q Q:129 4122 659

邮箱:sales@xinbeibio.com,全国招代理商经销商欢迎联系本公司


上一篇:没有了
下一篇:没有了