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  • D301

Mouse Genotyping Kit # D301

货号:D301
产品详情
货号
规格
价格
保存条件
D301-01
200次
RMB 1280 699
Mouse tissue Lysis buffer 2 ~8 ℃,其余组分 -20℃

产品介绍

    本试剂盒包含小鼠DNA粗提和PCR扩增体系,适用于鉴定小鼠基因型。小鼠基因组粗提取仅需要20分钟,无需繁杂的基因组提取操作。本试剂盒品包含Mouse tissue Lysis buffer 、蛋白酶K 和 2 x Neo Taq PCR Mix 三个组分。蛋白酶K搭配Mouse tissue Lysis buffer可以在15分钟内快速释放基因组DNA;2 x Neo Taq PCR Mix 是为Mouse Genotyping 优化的Taq mix,以稳定扩增2 kb以内的片段。

产品组分

组分D301-01(200次)
Mouse tissue Lysis buffer20 mL
Proteinase K0.4 mL
2 × Neo Taq PCR Mix2 x 1 mL

产品使用

A.小鼠基因组DNA粗提

   1. 按照一个反应100 μL Mouse tissue Lysis buffer + 2 μL Proteinase K 配制组织消化液,充分混匀。请勿长时间放置。

   2. 取1-2 mm小鼠尾巴(小鼠耳朵、脚趾亦可)至离心管,加入100 μL新鲜消化液,混匀并瞬离,确保组织被消化液浸没。

   3. 55℃孵育15 min,95℃ 5 min 失活蛋白酶 K;离心后取上清做PCR模板。组织块未完全消化不影响后续PCR扩增。


B.PCR扩增

   1.  2 × Neo Taq PCR Mix  完全解冻后,颠倒混匀,配置如下反应体系:

DNase free H2O      补足至 20 μLa
上游引物(10 μM)             0.5 μL
下游引物(10 μM)                0.5 μL
模板 (小鼠组织裂解液)             1-2 μLb
2 × Neo Taq PCR Mix               10 μL

   注:a.可以等比例缩放反应体系体积,但不要小于10 μL;b.加入模板量不要超过2μL(体系的1/10体积),模板长期保存请置于-20℃冰箱。建议每次添加阴性对照以排除假阳性结果。


   2. 推荐反应程序(具体扩增程序应当以扩增具体基因做相应调整)

95 ℃3分钟
95 ℃15秒


30-35个循环数


Ya ℃20秒
72 ℃60秒/kb
4 ℃保存

a:退火温度一般为在Tm ± 5℃之间尝试,无产物或者产物少降低退火温度,有非特异性产物提高退火温度。

b:加入3条或者3条以上引物,退火时间请增加至35秒,利于多条引物同时退火。

Mouse Genotyping Kit产品使用案例:鼠尾直接扩增


产品说明书:

D301-neo-enzy.pdf



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