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Mouse Genotyping Kit
货 号：D301
保存条件：Mouse tissue Lysis buffer 2 ~8 ℃，其余组分 -20℃
产品介绍：
本试剂盒包含小鼠DNA粗提和PCR扩增体系，适用于鉴定小鼠基因型。小鼠基因组粗提取仅需要20分钟，无需繁杂的基因组提取操作。本试剂盒品包含Mouse tissue Lysis buffer 、蛋白酶K 和 2 x Neo Taq PCR Mix 三个组分。蛋白酶K搭配Mouse tissue Lysis buffer可以在15分钟内快速释放基因组DNA；2 x Neo Taq PCR Mix 是为Mouse Genotyping 优化的Taq mix，以稳定扩增2 kb以内的片段。
产品组成：
| 组分 | D301-01（200次） | D301-02（500次） |
| Mouse tissue Lysis buffer | 20 mL | 50 mL |
| Proteinase K | 0.4 mL | 1 mL |
| 2 × Neo Taq PCR Mix | 2 x 1 mL | 5 × 1 mL |
产品使用：
A.小鼠基因组DNA粗提
1. 按照一个反应100 μL Mouse tissue Lysis buffer + 2 μL Proteinase K 配制组织消化液，充分混匀。请勿长时间放置。
2. 取1-2 mm小鼠尾巴（小鼠耳朵、脚趾亦可）至离心管，加入100 μL新鲜消化液，混匀并瞬离，确保组织被消化液浸没。
3. 55℃孵育15 min，95℃孵育5 min 失活蛋白酶 K；离心(12000rpm,5min)后取上清做PCR模板。组织块未完全消化不影响后续PCR扩增。
B.PCR扩增
1. 2 × Neo Taq PCR Mix 完全解冻后，颠倒混匀,配置如下反应体系:
DNase free H2O
| 补足至 20 μLa |
上游引物（10 μM）
| 0.5 μL |
下游引物（10 μM）
| 0.5 μL |
模板 （小鼠组织裂解液）
| 1-2 μLb |
2 × Neo Taq PCR Mix
| 10 μL |
注：a.可以等比例缩放反应体系体积，但不要小于10 μL；b.加入模板量不要超过2μL(体系的1/10体积),模板长期保存请置于-20℃冰箱。建议每次添加阴性对照以排除假阳性结果。
2. 推荐反应程序
a：退火温度一般为在Tm ± 5℃之间尝试，无产物或者产物少降低退火温度，有非特异性产物提高退火温度。
b：加入3条或者3条以上引物，退火时间请增加至35秒，利于多条引物同时退火。
本品仅供科研使用，不能用于人和动物医疗诊断
