说明书下载
HyperScript III miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (bystem-loop)
货 号:R601
保存条件:- 20 ℃长期储存
产品介绍:
本品为以microRNA(miRNA)为模板利用茎环法合成1st Strand cDNA 的试剂盒。通过使用茎环逆转录引物本试剂盒可以合成高度均一的cDNA用于qPCR定量。试剂盒所使用的逆转录酶是基于M-MLV定向进化而来的新一代逆转录酶,具有更低的RNase H活性、更高的热稳定性和cDNA合成效率,搭配为其优化的最适buffer,有利于miRNA特异性逆转录产物。后续的miRNA定量PCR可以使用本公司的2× S6 miRNA SYBR qPCR Mix。茎环引物可咨询本公司。
产品组成:
组分 | R601-02 (100个反应) |
5 × HyperScript miRNA Buffer | 400 μL |
HyperScriptTM miRNA Enzyme Mix | 200 μL |
RNase-free ddH2O | 1.5 mL |
温馨提示:
·5 × HyperScript miRNA Buffer若出现白色沉淀,请颠倒混匀确保沉淀完全溶解后使用。
·为保证实验成功率和准确性,请勿使用过度降解的RNA。
·配置反应液时,请使用RNase-free枪头、Microtube等。
产品使用:
1.配置逆转录反应体系
请配置如下反应液:
Total RNA | 1ng - 5 μg |
5 × HyperScript miRNA Buffer | 4 μL |
HyperScriptTM miRNA Enzyme Mix | 2 μL |
Stem-Loop Primers* | 2 pmol(1μM,2 μL) |
RNase-free ddH2O | 补足至20 μL |
2.逆转录反应程序
请按如下条件进行逆转录反应:

注:a. HyperScript miRNA Enzyme 在37-60℃均有较强活性;若目标RNA区域有高GC部分,可提高逆转录温度至55℃。
b.85℃ 5s 可以失活逆转录酶,请勿省略该步骤。
逆转录产物可直接用于下游实验,也可置于4℃短暂放置,3-6个月内-20℃保存,长期存放请置于-80℃冰箱,cDNA小份分装避免反复冻融。
4.附茎环法逆转录过程:

本品仅供科研使用,不能用于人和动物医疗诊断