服务介绍:
新贝生物拥有多年的蛋白表达经验,已成功交付很多疑难蛋白的交付,包括毒性蛋白、生长因子、酶等。主要应用于:作为抗原制备抗体;参与细胞实验与动物实验;测定蛋白酶活;研究蛋白相互作用(免疫共沉淀,GST pull down);蛋白结晶结构研究,免疫组化实验等,不同的应用对于蛋白的要求也互不相同。在进行蛋白表达时,通常要考虑以下几点:
蛋白本身特性:蛋白的分子量大小,蛋白来源/物种,是否为毒性蛋白,蛋白翻译后修饰程度,蛋白结构复杂程度,在细胞内外的定位等;
蛋白表达系统选择:不同蛋白表达系统有不同的优势,如表达量高低,能否糖基化修饰等,结合蛋白应用并全面考虑,选择最合适的蛋白表达系统;
蛋白需求量:不同下游应用需求量有所区别,制备抗体需2~8mg,常规功能学研究10~200ug,细胞实验或药物研究则需更多;
蛋白纯化标签去留:蛋白纯化标签主要有His,GST,SUMO,MBP等。His标签只有0.84kd,利于纯化且对蛋白无影响,可以保留;其他属于大标签,可以提高蛋白可溶性,但需要切除,否则会影响蛋白结构功能。
E. coli表达系统是目前应用最为广泛,也是最为经济实惠的原核蛋白表达系统, E. coli细胞遗传背景清楚,目的基因表达水平高,培养周期短,抗污染能力强,易于放大,可以适用于多种属蛋白的表达,是重组蛋白表达和生物技术产业化发展的重要工具,尤其对小分子蛋白的生产具有极大的优势。新贝生物有大量E. coli 可溶性蛋白表达和纯化及蛋白复性经验,拥有多种E. coli细胞株和表达载体,为您提供优质的原核蛋白表达服务。
服务优势:
提供多种表达载体和E. coli 细胞,实现从基因到纯化后蛋白的一站式服务
超过10年的蛋白原核表达经验
专业博士从事蛋白纯化
服务内容:
服务步骤 | 具体内容 | 周期 | 交付内容 |
密码子优化及基因合成(可选) |
| 1-2周 | 含基因片段或者质粒 |
载体构建 | 克隆、测序验证、质粒制备 | 1-2周 | 质粒构建报告 |
表达评估 | 选择合适菌株、小量表达、SDS-PAGE分析评估蛋白表达情况 | 1-2周 | 评估结果 |
蛋白表达及纯化 | 根据表达评估选择合适条件进行表达纯化,并分析结果 | 2-3周 | 实验报告、提供蛋白样品给客户 |
大量表达及纯化(可选) |
| 2-3周 | 实验报告、提供蛋白样品给客户 |
服务流程:
1.双方沟通确定蛋白表达要求
2.签订技术服务合同(含报价)并收取预付款
3.进行蛋白表达可行性实验
4.反馈蛋白表达可行性实验结果 / 寄送样品
5.根据客户要求进行蛋白表达的大量生产(合同如果有)
案例展示: