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4minSpin RNA Purification Kit
货 号：TQ402
保存条件：室温保存
产品介绍：
本品可快本品可快速（4步室温离心，6分钟等待时间）从106-107培养细胞提取总RNA(miRNA除外)，本品采用特殊配方无需酚氯仿抽提,可以快速裂解样本并直接结合RNA到柱子膜上(省去加乙醇步骤)，并抑制核酸酶，保持RNA完整性。所得的RNA可用于PCR(货号R201、T202、G302)，qPCR(货号R202、Q204)等实验。
产品组成：
| 组分 | TQ301-01 (50次) |
| Lysis/Binding Buffer（裂解/结合缓冲液） | 2×30 mL |
| Wash Buffer（清洗液,已加乙醇） | 2×60 mL |
| Elution Buffer （洗脱液） | 10 mL |
| 4minSpinTM RNA Columns & collection tubes(RNA吸附柱和收集管套件) | 100套 |
| RNase Free Tubes(1.5 mL无RNA酶离心管，用于裂解样本和最后一步洗脱使用) | 200个 |
注意事项：
尽量使用新鲜样本，以保证RNA不被降解。
本说明书推荐的最适细胞量能满足大部分样本，对于核酸含量过高或者过低样本，可酌情减少或者增加起始样本量。
提取过程在室温进行，试剂不可冷冻(如有沉淀37℃加热溶解)，以免产生沉淀堵塞纯化柱，最后得到的RNA要分装冷冻保存。
第一步的样本裂解很重要，裂解后要清澈透亮，如果有不溶物可能会堵塞纯化柱。
产品使用：
1.1裂解细胞：不同培养器皿对应的细胞量如下图，其他类型器皿按照面积计算估计细胞量：
| 培养器皿 | 单孔面积/cm2 | 细胞量 |
| 12孔培养板 | 4.5 | 1 × 106 |
| 6孔培养板 | 9.6 | 2.5 × 106 |
| 3.5 cm 培养皿 | 8 | 2 × 106 |
| 6 cm 培养皿 | 21 | 5.2 × 106 |
| 25 cm2 培养瓶 | 25 | 5 × 106 |
吸净培养器皿里的培养液，按照106-107细胞量加入500μl Lysis/Binding Buffer，用移液器反复吹打(或者使用细胞刮刀刮下细胞)，直至细胞全部脱落，转移到1.5ml RNase Free Tubes，充分颠倒混匀10次，静置1分钟。
a. 此步骤也可用胰酶消化贴壁细胞8000rpm离心2分钟后，加入500μl Lysis/Binding Buffer后续操作如上。
b.悬浮细胞收集8000rpm离心2分钟后，用100ul PBS重悬后（重悬很重要），加入500μl Lysis/Binding Buffer后续操作如上
c. 如果样本不立即提取需要保存，可以在上述细胞加500μl Lysis/Binding Buffer充分裂解之后（细胞内也有RNase酶，所以要裂解充分，利于Lysis/Binding Buffer抑制RNase酶），保存到-80℃冰箱
1.2 RNA结合：将上一步裂解产物转移到RNA Columns & collection tubes，12000rpm室温离心1分钟，弃滤液。
1.3 RNA清洗：加入500ul Wash Buffer(重要，不要增加体积),12000rpm室温离心1分钟，弃滤液。
1.4 甩干乙醇：不加液体，空离，12000rpm室温离心1分钟。
1.5 RNA洗脱：将上面的RNA Columns小心转移(重要，不要碰到管内液体)到新的1.5ml RNase Free Tubes，在膜中央（重要）加入25-50ul Elution Buffer,室温静置1分钟，12000rpm室温离心1分钟，得到的RNA立即使用本公司逆转录试剂盒（货号：R202）进行逆转录实验，或者小份分装RNA保存在负80度冰箱。
本品仅供科研使用，不能用于人和动物医疗诊断
